出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法 第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌  (SN/T 5364.7-2021)

Droplet digital PCR method for detection of pathogens in export food-Part 7:Shiga Toxin-producing Escherichia coli

针对产志贺毒素大肠埃希氏菌溶血素前体蛋白基因(hlyA)保守序列设计引物、探针,将一定浓度的引物、探针与模板DNA及数字PCR反应预混液混合,配成PCR反应体系。将该数字PCR体系分布到10000~20000个微滴中,使大部分微滴中模板DNA分子的数量为1或0,然后进行PCR扩增。hlyA的基因探针5’端标记FAM荧光基团,利用数字PCR系统的检测通道,可对每个微滴的荧光信号进行采集分析。含有模板DNA的微滴出现荧光信号的增强,形成阳性微滴簇。根据阳性微滴的有无判定样品中是否含有产志贺毒素大肠埃希氏菌。

发布时间： 2021-11-22

实施时间： 2022-06-01

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