出口食品中致病菌检测方法微滴式数字 PCR 法第 2 部分:霍乱弧菌  (SN/T 5364.2-2021)

Droplet digital PCR method for detection of pathogens in export food-Part 2:Vibrio cholerae

分别针对霍乱弧菌种属特异性gbpA基因及毒力基因tcpA设计引物/探针,将一定浓度的引物、探针与模板DNA及数字PCR反应预混液混合,配成双重数字PCR反应体系。将该双重数字PCR体系分布到10000~20000个微滴中,使大部分微滴中模板DNA分子的数量为1或0,然后进行PCR扩增。gbpA基因及tcpA基因探针5’端分别标记FAM和VIC荧光基团,利用数字PCR系统的双通道检测,可同时对两个基因的荧光信号进行采集分析。根据gbpA基因及tcpA基因所对应的阳性微滴的有无判定样品中是否含有霍乱弧菌和含毒

发布时间： 2021-11-22

实施时间： 2022-06-01

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